Page 152 -
P. 152
ิ
ิ
ื
ิ
โครงการหนังสออเล็กทรอนกสด้านการเกษตร เฉลมพระเกียรตพระบาทสมเด็จพระเจ้าอยู่หัว
์
ิ
แบบแบตชโดยทั่วไปจะใชอาหารเพาะเชื้อที่มีปริมาณแหลงคารบอนมากเกินพอ คือ มีอัตราสวน
คารบอนตอไนโตรเจน (C/N ratio) สูง โดยในระยะแรกของการเพาะเลี้ยงที่ปริมาณแหลงไนโตรเจน
ยังไมถูกจำกัด แหลงคารบอนจะถูกใชไปเพื่อการเจริญและสรางมวลชีวภาพ (growth phase)
จากนั้นเมื่อแหลงไนโตรเจนถูกใชจนหมด ทำใหเซลลอยูในภาวะขาดแคลนแหลงไนโตรเจน เซลล
เกือบทั้งหมดจะหยุดเจริญและเขาสูระยะสะสมลิพิด (lipid accumulation phase) หรือลิพอจีนิกเฟส
(lipogenic phase) แหลงคารบอนที่เหลืออยูจะถูกใชไปเพื่อการสะสมลิพิด โดยพบวาหากมวลชีวภาพ
ที่ผลิตขึ้นในชวงการเจริญสูง จะสงผลใหอัตราการผลิตลิพิดในระยะสะสมลิพิดสูงตามไปดวย (Rossi
et al. 2011) ซึ่งการผลิตมวลชีวภาพจะขึ้นอยูกับความเขมขนของแหลงคารบอนเริ่มตนในอาหาร
เพาะเชื้อดวย (Beopoulos et al. 2009) แตการใชอาหารเพาะเชื้อที่มีความเขมขนของแหลงคารบอน
เริ่มตนสูง ๆ อาจสงผลยับยั้งจุลินทรียหรือที่เรียกวา การยับยั้งดวยซับสเตรต (substrate inhibition)
และอาจมีการผลิตผลผลิตขางเคียงอื่น ๆ เชน กรดอินทรีย (Rossi et al. 2011) ดังนั้นการเพาะเลี้ยง
เพื่อใหไดความหนาแนนของเซลลสูง ๆ จึงไมสามารถทำไดดวยการเพาะเลี้ยงแบบแบตช (Li et al.
2007)
การเพาะเลี้ยงแบบเฟด-แบตช (Fed-batch cultivation) บทที่ 5
การเพาะเลี้ยงแบบเฟด-แบตชเปนระบบที่มีการเติมสารอาหารที่จำเปนตอการเจริญหรือ
การสรางผลผลิตลงไปในระบบเปนระยะ (intermittent feeding) หรือเติมแบบตอเนื่อง (continuous
feeding) ทำใหสามารถควบคุมความเขมขนของสารอาหาร โดยเฉพาะอัตราสวนของแหลงคารบอน
่
ตอแหลงไนโตรเจนที่เปนตัวแปรสำคัญในการสะสมลิพิดใหอยูในระดับที่เหมาะสม (optimal level) ซึง
สามารถทำไดโดยการปรับอัตราเร็วในการเติมสารอาหาร (feed rate) และองคประกอบของอาหาร
สงผลใหไดความเขมขนของลิพิด (lipid concentration) หรือผลผลิตลิพิด (lipid yield) สูงสุดเมื่อสิ้นสุด
กระบวนการ (Lim 2013; Yamanè and Shimizu 1984) โดยทั่วไปการเพาะเลี้ยงแบบเฟด-แบตชถูก
นำมาใชเพื่อหลีกเลี่ยงผลการยับยั้งจากการใชซับสเตรตเริ่มตนความเขมขนสูง หรือผลการกดดัน
จากแคทาโบไลตหรือกลูโคส (catabolite repression/glucose repression) ที่เกิดขึ้นในการเพาะเลี้ยง
แบบแบตช ขอไดเปรียบของการเพาะเลี้ยงแบบเฟด-แบตช คือ ใชระยะเวลาในการเพาะเลี้ยงสั้น ได
ความเขมขนมวลชีวภาพสูง เพิ่มอัตราการผลิตตอหนวยเวลา (productivity) ชวยลดปญหาการยับยั้ง
จากการใชซับสเตรตเริ่มตนความเขมขนสูง รวมทั้งผลการยับยั้งจากผลิตภัณฑสุดทาย (end-
product inhibition) ลดการสูญเสียน้ำจากระบบที่เกิดจากการระเหย ลดความหนืดของน้ำหมัก
(culture broth) จึงสงผลใหมีอัตราการละลายของออกซิเจนสูง (Chang et al. 2013; Yamanè and
Shimizu 1984) การเพาะเลี้ยงแบบเฟด-แบตชไดนำมาประยุกตใชในการเพาะเลี้ยงจุลินทรียเพื่อ
การประยุกตใชยีสตเพื่อการเกษตรและอุตสาหกรรมยุคใหม 143