Page 155 -
P. 155
ิ
ิ
ื
์
ิ
โครงการหนังสออเล็กทรอนกสด้านการเกษตร เฉลมพระเกียรตพระบาทสมเด็จพระเจ้าอยู่หัว
ิ
การปรับเปลี่ยนชนิดของแหลงคารบอนโดยวิธีการเพาะเลี้ยงสองขั้นตอน เปนแนวทางหนึ่ง
ในการเพิ่มศักยภาพการผลิตลิพิด การเพาะเลี้ยง R. toruloides AS 2.1389 (Huang et al. 2016) โดย
ใชกลูโคสเปนแหลงคารบอนในอาหารเพาะเชื้อที่มีอัตราสวนคารบอนตอไนโตรเจนต่ำ (C/N ratio =
15) เปนเวลา 4 วัน จากนั้นถายเซลลเพื่อเพาะเลี้ยงในอาหารเพาะเชื้อที่มีกรดแอซีติกเปนแหลง
คารบอนภายใตภาวะที่มีอัตราสวนคารบอนตอไนโตรเจนสูง (C/N ratio = 200) ซึ่งกลูโคสในการ
เพาะเลี้ยงขั้นแรกสามารถใชเพื่อสงเสริมการเจริญของยีสตไดดี ขณะที่กรดแอซีติกซึ่งมีผลตอการ
ยับยั้งการเจริญ จะถูกนำมาในการเพาะเลี้ยงขั้นที่สอง ซึ่งเปนขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ไมตองการ
สงเสริมการเจริญ โดยพบวาสามารถผลิตชีวมวลได 4.21 กรัมตอลิตร และลิพิดสะสมภายในเซลลที่
38.6 เปอรเซ็นตของน้ำหนักแหง ในอีกทางหนึ่งการเพาะเลี้ยงยีสตเมื่อใชแหลงอาหารราคาถูก เชน
การเพาะเลี้ยงยีสต Rhodosporidiobolus fluvialis DMKU-SP314 โดยใชไฮโดรไลเสตของยอดออยเพื่อ
เพิ่มจำนวนเซลลในการเพาะเลี้ยงระยะที่ 1 และใชกลีเซอรอลดิบจากการผลิตไบโอดีเซลเพื่อสงเสริม
การสะสมลิพิดของยีสตในการเพาะเลี้ยงขั้นตอนที่ 2 ซึ่งไดผลผลิตชีวมวลถึง 21.07 กรัมตอลิตร
ความเขมขนลิพิดที่ 15.85 กรัมตอลิตร และเปอรเซ็นตของลิพิดสะสมภายในเซลลที่ 73.04 ของ
บทที่ 5 น้ำหนักเซลลแหง (Boonyarit et al. 2020)
จากการศึกษากอนหนา โดยการเพาะเลี้ยงยีสต R. fluvialis DMKU-RK253 (Polburee et
al. 2016) ในเออเลนเมเยอรฟลาสก (Erlenmeyer flask) ขนาด 500 มิลลิลิตร เมื่อใชกลีเซอรอลดิบ
ซึ่งเปนของเหลือจากการผลิตไบโอดีเซลเปนแหลงคารบอน และใชผงชูรสเปนแหลงไนโตรเจนในการ
เพาะเลี้ยงขั้นตอนที่ 1 และการเพาะเลี้ยงไดถูกปรับปรุงในการเพาะเลี้ยงขั้นที่ 2 เพื่อเพิ่มปริมาณการ
ผลิตลิพิด โดยเพาะเลี้ยงดวยวิธีการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิระหวางการหมัก (จาก 30 องศาเซลเซียส
เปน 25 องศาเซลเซียส) รวมกับการใชเซลลความเขมขนสูง ไดปริมาณลิพิดสูงถึง 14.11 กรัมตอลิตร
เมื่อมีชีวมวลเทากับ 22.17 กรัมตอลิตร (เทากับสะสมลิพิด 63.7 เปอรเซ็นตโดยน้ำหนัก) และตรวจ
พบเม็ดลิพิดขนาดเล็กในอาหารที่ใชเพาะเลี้ยง รายงานดังกลาวแสดงใหเห็นวานอกจากการปรับ
ความเขมขนของแหลงอาหารเพาะเชื้อใหเหมาะสมสำหรับการผลิตลิพิดแลว ภาวะการเพาะเลี้ยง
เชน อุณหภูมิ พีเอช ความเขมขนของเซลลตั้งตนในการเพาะเลี้ยง ยอมสงผลตอความสามารถในการ
สะสมลิพิดของเซลลเชนกัน
วิธีการเพาะเลี้ยงสองขั้นตอนยังคงไดรับความสนใจ และมีการศึกษาอยางกวางขวาง
(Karamerou and Webb 2019) แมวาวิธีการดังกลาวจะสามารถดำเนินการไดโดยการเพาะเลี้ยงใน
ฟลาสก อยางไรก็ตามการเพาะเลี้ยงสองขั้นตอนมีขอเสียเมื่อทำการเพาะเลี้ยงในขนาดใหญ
เนื่องจากตองใชถังปฏิกรณชีวภาพมากกวา 1 ถัง และมีความยุงยากในการถายเชื้อระหวาง
การเพาะเลี้ยง ซึ่งสงผลใหคาใชจายสูงขึ้น นอกจากนั้นที่การเพาะเลี้ยงขั้นที่สองที่มีการเปลี่ยนแปลง
146 การผลิตลิพิดจากยีสต